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RNA合成及标记
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RNA的合成方法和DNA一样,但和DNA化学合成相比,RNA的化学合成较为困难,原因是碱基之间的偶联效率较低、制品容易分解等,另外RNA合成成本极高,所以RNA合成的价格比DNA的较高。
RNA干扰(siRNA,miRAN)
代做实验
通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明;一个称为Dicer的酶,是RNase III家族中特异识别双链RNA的一员,它能以一种ATP依赖的方式逐步切割由外源导入或者由转基因,病毒感染等各种方式引入的双链RNA,切割将RNA降解为19-21bp的双链RNAs(siRNAs),每个片段的3’端都有2个碱基突出。
RNAi RNA干扰 (siRNA/micRNA)
代做实验
目前对RNAi (RNA interference)的定义有很多种,不同的资料对其定义的侧重点也不尽相同,如果将RNAi看作一种生物学现象,可以有以下定义:① RNAi是由dsRNA介导的由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。② RNAi是有dsRNA参与指导的,以外源和内源mRNA为降解目标的转基因沉默现象。具有核苷酸序列特异性的自我防御机制,是一种当外源基因导入或病毒入侵后,细胞中与转基因或入侵病毒RNA同源的基因发生共同基因沉默的现象。
基于载体的siRNA技术
代做实验
RNAi (RNA干扰)技术已经成为研究基因功能的重要工具,与以化学合成为基础的siRNA技术相比,基于载体的siRNA技术优势在于:可以进行较长期研究- -带有抗生素标记的siRNA载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续时间更久,而且利于筛选。然而,制备所需要的siRNA载体需要花费一定的时间 和精力。Realgene利用基因合成技术,为广大客户提供包括siRNA靶序列设计、载体选择以及质粒构建等一整套的服务。利用该技术,我们可以为您构建您所需的各种类型的siRNA载体。
GMR-miRTM MicroRNA Detection流程
代做实验
客户用microRNA mimics 或者microRNA inhibor可以上调或者下调某一基因或者某些基因的表达,提供完整的服务体系。
GMR-miR microRNA mimics 阴性对照(基于线虫C. elegans 的micoRNA)
代做实验
客户提供不同长度的microRNA mimics control,microRNA mimics control是基于线虫C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLAST比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列,microRNA序列来自sanger miRNA数据库GMR-miRTM microRNA mimics conrol的应用
GMR-miR microRNA inhibitors(miRNA抑制物)
代做实验
GMR-miRTM microRNA Inhibitors 是单链的化学修饰的增强型寡核苷酸对sanger miRNA 数据库:http://microrna.sanger.ac.uk中所有人、小鼠以及大鼠miRNA有效
upersilencingTM shRNA表达载体系统
代做实验
siRNA表达载体带有抗生素标记,可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久。对于一个已知有效的siRNA序列(例如,经过siRNA合成方法筛选获得的),需要维持较长时间的基因沉默时,推荐使用shRNA载体系统。致力于提供最先进和最方便的shRNA相关工具,最近推出新一代shRNA表达质粒,一种高效即用型载体,该载体在细胞内可以持续产生siRNAs,从而达到持久抑制目标基因表达的目的。
GMR-miRTM FAM 标记 microRNA mimics 阴性对照
为客户提供不同长度的microRNA mimics control,microRNA mimics control是基于线虫C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLAST比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列,microRNA序列来自sanger miRNA数据库(http://microrna.sanger.ac.uk/sequences)
GMR-miR microRNA mimics (miRNA技术服务)
代做实验
为客户提供不同长度、不同形式的microRNA mimics,microRNA序列来自sanger miRNA数据库GMR-miRTM microRNA mimics的应用
RNA干扰项目服务(RNAi技术服务)
代做实验
RNAi不仅可作为研究功能基因的强大武器,而且可以抑制致病基因的表达并作为一种潜在的治疗方式用于疾病的治疗。RNAi实验的成功关键在于以下几点:
即用型Lentivirus shRNA 构建包装服务
代做实验
即用型Lentivirus shRNA 构建包装服务 Lentivirus shRNA服务特点 适用于原代培养细胞,难以转染的各种细胞 可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株 您通过SupersilencingTM Vector方法筛选到有效的的基因沉默靶点,还需要构建慢病毒载体来满足进一步实验需求
Lentivirus慢病毒介导的siRNA活体实验用病毒液服务
代做实验
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
siRNA对照( 阴性对照,阳性对照)
代做实验
可提供与目的基因序列无同源性的通用阴性对照和将选中的siRNA序列打乱(scrambled)的阴性对照
RNAi全套及单项服务
代做实验
成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。卓康公司专业的设计人员为您提供完整的RNAi实验设计服务。卓康公司为您提供优化的siRNA,shRNA以及RNAi检测的探针和引物的设计服务。完善的实验设计,精准的靶标以及引物设计使您的实验节省人力和物力。
supersilencingTM shRNA载体
代做实验
每套载体均包括线状或环状shRNA表达载体,并为您提供整体的解决方案。
化学修饰siRNA用于RNAi活体研究(In vivo RNAi)
代做实验
在培养的哺乳动物细胞中,RNA干扰已经广泛应用于基因功能的研究。虽然RNAi干扰已经在体外(in vitro)研究中成为一个强大的研究方法,但是我们还是要着眼于将基因功能的研究放在整体生物中进行评价。为此,研究人员现在应用RNAi活体研究(RNAi in vivo)的方法来进行研究。虽然此项研究还处于早期,但是活体RNAi已经越来越广使用并取得了不少进展。
GMR-miR FAM 标记 microRNA inhibitors 阴性对照
代做实验
公司为客户提供不同长度的microRNA inhibitors control,microRNA inhibitors control是基于线虫C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLAST比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列,microRNA序列来自sanger miRNA数据库(http://microrna.sanger.ac.uk/sequences)
SuperSilencing TM shRNA质粒表达载体组合套餐
代做实验
针对目的基因设计并制备4个shRNA载体,确保4个shRNA中,至少一个,在mRNA水平的基因的抑制效率在70%以上.针对目的基因的探针和引物方便客户检测基因沉默效果。
SuperSilencing TM shRNA质粒表达载体套餐
代做实验
针对目的基因设计并制备4个shRNA载体,确保4个shRNA中,至少一个在mRNA水平的基因的抑制效率在70%以上.
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