1、 cDNA文库构建
技术服务详细描述
cDNA文库不同于基因组文库，被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNA。CDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。从而做cDNA克隆时应是先从获得mRNA开始，在此基础上，通过反转录酶作用产生一条与mRNA相互补的DNA链，然后除掉mRNA，以第一条DNA链为模板复制出第二条DNA链（双链）；再进一步把此双链插入原核或真核载体。
cDNA文库构建一般分为六个阶段：
阶段1：反转录酶催化合成cDNA第一链
阶段2：cDNA第二链的合成
阶段3：cDNA的甲基化
阶段4：接头或衔接子的连接
阶段5：Sepharose CL-4B凝胶过滤法分离cDNA
阶段6：cDNA与λ噬菌体臂的连接
客户提供：
请您提供新鲜的且尽量多的材料
1、如果实验材料为动物组织材料，样品质量需大于5 g。
2、如果实验材料为植物样品标本，样品质量需大于20 g。
3、如果实验材料为各种培养细胞，请您提供5×107以上培养好的细胞。
4. 您也可以直接提供给我们Total RNA，但要保证RNA没有降解，需要通过电泳等方法进行判断，其纯度
要求A260/A280≥1.8，样品总量需大于300 mg。
我们将为您提供：
完整的实验报告，构建好的cDNA文库（提供给您的实验结果为连接产物形式)。
上海卓康生物科技有限公司
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