2、 慢病毒包装服务
技术服务详细描述
卓康生物慢病毒服务通常利用four-plasmid方法瞬时共转染293FT细胞制备重组病毒载体：包装辅助结构(HIV gag-pol, rev, and tat)，包膜质粒(env)和慢病毒转移载体。转染细胞温育培养48-72小时以让慢病毒颗粒释放于细胞培养液中。将细胞培养液过滤并超速离心浓缩，通过和GFP共表达的转染细胞的FACS分析或定量PCR预测病毒的滴度。
一、客户提供信息:
◆ 客户具体需要的服务项目
◆ 所要表达的外源基因的名称，序列，客户如有现成的DNA模板可提供并提供电泳图片，图谱等相关信息
◆ 所要选择的慢病毒载体（我们现在可供选择具有GFP，lacZ报告基因及不带报告基因的慢病毒载体）
◆ 所需要表达的外源基因是否要带有融合标签，如果需要请选择需要的标签，并选择加入标签的位置
◆ 是否需要检测外源基因的表达，如需要请提供相应的抗体
◆ 所需要的病毒滴度
◆ 如需要筛选稳定细胞株的客户需选择符合自己需要的细胞株（可以自行提供）
二、服务价格：
我们将采取分步收费的方式，即按照所提供的构建，重组，包装，扩增及纯化的一系列不同的服务，根据客户的实际需要，对每项服务进行具体的核算。客户如需检测其目的基因表达所需费用另行核算。
说明 | 周期(天) | 价格（ ￥ ） |
构建 | 14 | 2,000.00 |
1.合成基因(可选，费用另算)
2.根据客户需求，克隆至表达载体 |
转染和插入基因检测 | 7 | 2,000.00 |
1.转染至100mm孔或者6孔板和蛋白表达WB检测 |
病毒包装 | 30-40 | 10,000.00 |
1.细胞培养
2.转染
3.原代病毒收集 |
病毒纯化 | 2 | 2,000.00 |
1.超速离心 |
QC | 30 | 3,000.00 |
1. qPCR滴度检测
2.插入基因PCR鉴定
3.RCA检测(可选) |
三、交付结果：
◆ 插入慢病毒载体中目的基因的测序报告
◆ 提供构建好的慢病毒载体质粒（4ug），并附上酶切或PCR鉴定结果
◆ 对于需要获得病毒的客户，我们将提供1ml 含106-107病毒的浓缩后病毒液，并附上一份QC报告
◆ 对于需要通过慢病毒获得稳定细胞株的客户，我们将提供106数量的细胞，并附上一份QC报告
上海卓康生物科技有限公司
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