发布时间:2021/6/2 13:56:57 阅读次数:180
背景介绍 | CD40配体(CD40L/CD154)是TNF分子超家族中的一员,它是一种分子量为39kDa的糖蛋白,主要表达于活化的T细胞.分子量为15-18kDa的可溶性CD40L(sCD40L)通过蛋白水解产生.CD40L与抗原提呈细胞(APC)表面的CD40结合,根据不同的靶细胞类型可产生多种效果.CD40L作为共刺激分子,对T细胞亚群滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)尤其重要.在Tfh细胞中,CD40L与B细胞表面的CD40结合,促进B细胞成熟和功能发挥,从而促进细胞与细胞之间的联系. CD40L基因的缺失导致无法发生免疫球蛋白类型转换,且与高IgM综合征有关.CD40L缺失也会阻断生发中心形成,因此阻止适应性免疫系统中的重要过程即抗体亲和力成熟. |
检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术.特异性抗人sCD40L抗体预包被在高亲和力的酶标板上.酶标板孔中加入标准品 待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的sCD40L与固相抗体和检测抗体结合.洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP).洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色.颜色反应的深浅与样本中sCD40L的浓度成正比.加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570-630 nm)测定吸光度值. |
组分 | 包被抗sCD40L单克隆抗体的96孔聚苯乙烯酶标板 人sCD40L冻干标准品 sCD40L检测抗体 标准品稀释液 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 检测缓冲液(10×) 底物(TMB) 终止液 洗液(20×) 封板膜 |
分析类型 | 夹心ELISA |
样本类型 | 血清 血浆,细胞培养上清及其他生物学样本 |
板式 | 96孔板,可拆 |
保存 | 试剂盒未拆开,4℃保存.已拆开,标准品-20℃保存,其它4℃保存. |
运输条件 | 4℃蓝冰运输 |
样本体积 | 血清血浆:20 μl细胞培养上清:100μl |
灵敏度 | 4.09 pg/ml |
标曲图 | ![]() |
标准曲线范围 | 62.5-4000 ng/ml |
回收率范围 | 88 %-110 % |
平均回收率 | 1.01 |
板间变异系数 | 3.2 %-8.4 % |
板内变异系数 | 5.2 %-6.2 % |