发布时间：2021/6/4 9:52:52 阅读次数：232
1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 （ELISA） .ELISA技术经过40多年的历史演变,目前仍然是用于定量检测大分子抗原常用的一种免疫测定技术.
无论你是实验室小白还是PhD大拿,只要是进行与免疫学相关的研究,一定离不开ELISA这门又老又实用的技术.然而,说起ELISA实验,每个人都有自己不同的观点,有心酸也有喜悦.为此,伊莱萨列出部分ELISA实验中的小诀窍,告诉你：这些坑以后不必再跳了,让你成为师妹眼中的暧昧.
师妹
师兄：“什么问题？”
师妹：“太多了,空白板；整板阳性或跳孔；标曲好样本值没结果等等.”
师兄：“不要着急,让我看看你的实验步骤和方案.”
这个试剂盒购自国内***厂家,按照说明书操作的啊.
我前几天用过伊莱萨公司牛MMP-9 ELISA试剂盒（Bovine MMP-9 ELISA Kit）,结果还不错.
针对你实验过程中的问题,需要注意的有以下几点：
1 样本：首先需要确认商品化试剂盒说明书中所述检测样本类型,血清 血浆和细胞上清还是组织裂解液等,样本禁用叠氮钠作防腐剂,避免反复冻融；
2 样本稀释倍数：根据预实验的不同稀释梯度来确定正式实验样本的稀释倍数.一般情况下,为了消除复杂基质中干扰成分的影响,至少进行2倍因子稀释；
3 为了试验结果的准确性,尽量每个样本都做双孔重复；数据分析采用4-相参数曲线拟合（4-pI或sigmoidal曲线拟合）；
4 如出现空白板的结果,请重复试验,确认每个步骤均正确操作,每步加样准确无误；
5 如出现整板阳或跳孔的结果,请重复试验,避免每个步骤可能引起的污染,确保正确无误的操作,特别是洗涤过程；
6 如果标曲好但是样本值没结果,说明试剂盒和操作均没有问题,可能原因：一是样本中目标分析物的含量太低,低于试剂盒的检测限,建议可选用更高灵敏度的产品或其他的方法检测；二是实验处理的方案需要调整优化；三是实验处理对样本中靶标物的含量无影响.
师妹：这么简单的技术,套路还很深.请告诉我如何可得到理想的ELISA实验结果,怎样才是理想的结果？
师兄：这个不能简单概括,只有确保每个环节都OK的情况下,结果才可以保证.最重要的有这些方面：
1 所有试剂组分必须回温后,开始使用；
2 精确配制各个组分且混匀,避免由于不准确稀释而造成的浓度误差,准确加样；
3 酶标板在温育时应加膜覆盖以避免液体蒸发；
4 洗板次数需严格按照说明书,彻底洗净残留的工作液,洗板后应尽快进行下一步操作,避免酶标板长时间处于干燥状态；
5 读数前,打开酶标仪,检查参数设定,使之稳定10分钟以上；
6 理想的实验结果应该是标曲线性关系好,样本值在标曲的范围之内,且实验组和对照组有显著的差异.
师兄：上海伊莱萨有限公司,他们家的ELISA试剂盒品质有保证,都是自主研发.
目前产品种类有500多种针对人 小鼠 大鼠等常见物种靶标和400多种针对牛 羊 兔 猪 鸡等非常见物种靶标,共1000多种ELISA试剂盒.
师妹：知道了,谢谢师兄的悉心指导啊,那我去联系厂家了（400-070-0802）
我们ELISA试剂盒研发实力和产品优势有：
人才优势：若干名资深专家,博士和硕士研究生组成的研发和检测团队；
研发平台：1000级洁净实验室,最高规格的干房,冷冻和冷藏库,知名品牌高端仪器设备
精选原料：国外血统,多级筛选,高端品质；
技术工艺：专业制造,严格执行全面规范的SOP；
严格质控：批批质检,数据真实,可追溯与重复；
种类齐全：400+小物种,500+常见物种,共1000多种；
性能卓越：线性范围广,高灵敏度,高特异性,高重复性,高均一性；
国际品质：与国外进口知名品牌同类产品平行性高；
应用广泛：检测分析物全面覆盖表面分子,信号转导等各领域；
畅销国外：产品已出口欧洲 美国 日本和韩国等发达国家；
支持服务：现货供应,完善的售前售后服务,极具竞争力的价格.
师妹：
伊莱萨：我们现在正在盛夏促销优惠,前所未有.96T试剂盒价格为：促销价1212元（原价2600元）.另有京东卡相送（2张）,100%中奖哦.
最重要的是,我们可以提供：
1 免费代测（直接给您提供用于文章发表的数据和图片）；
2 ELISA试剂盒开发服务（如果您的检测指标不在目录产品范围内）；
3 伊莱萨专项奖学金计划（您用ELISA试剂盒发表文章,可获一定金额的奖励金）.
师妹：
伊莱萨：非常感谢您的支持！......
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