发布时间:2021/6/4 10:05:29 阅读次数:273
服务
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围 种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本.并可提供免费代测.
技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)间接法(检测未知抗体)
1 用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml.在反应孔中加0.1ml,4℃?过夜.次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次.
2 加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃?孵育1小时.然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔).
3 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml.37℃?孵育0.5~1小时,洗涤.
4 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃?10~30分钟.
5 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+” “-”号表示.也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性.
1 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml,?每孔加0.1ml,4℃过夜.次日洗涤3次.
2 加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤.(同时做空白 阴性及阳性孔对照)
3 加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤.
4 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃?10~30分钟.
5 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+” “-”号表示.也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性.
客户须知
1 液体类标本(细胞培养上清 组织匀浆 血清 血浆 尿液 胸水 腹水 脑脊液等);
2 样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存.如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存;
3 请提前告诉我们:您样本的种属 样本数量 待测指标及其他特殊要求.
报告内容及标准
1 ELISA标准曲线;
2 详细的实验步骤;
3 完整的实验报告(试剂耗材,实验方法,实验结果及结果说明);
4 实验进行阶段,我公司客服人员会及时向您汇报实验进程.