发布时间：2025/8/15 15:49:37 阅读次数：8
1 ELISA试验出现非常弱的结果,常见有7种原因,其解决方法如下：
1）可能原因：温育的时间或者温度不够；解决方法：校正温育箱温度.2）可能原因：显色反应时间太短；解决方法：校正定时钟准确定时.
3）可能原因：所用配制缓冲液的蒸馏水有问题；解决方法：使用新鲜合格的蒸馏水.
4）可能原因：加入抗体/酶的稀释液浓度太低；解决方法：按照说明书保存试剂盒和准确配制工作液.校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密.
5）可能原因：酶标仪滤光片不正确；解决方法：检查酶标仪使用的滤光片.
6）可能原因：试剂盒没有充分平衡；解决方法：试剂室温平衡至少120分钟,确保所有试剂已平衡至室温.
7）可能原因：不正确的试剂储存方式；解决方法：按照说明书要求保存试剂盒.
2 试验结果白板,而且阳性对照不显色,应如何分析和查找原因?
答：试验结果白板,而且阳性对照不显色,常见原因如下：
a）可能原因：漏加或者误加试剂；解决方法：检查试验记录和剩余试剂.每次加液前均应核对标签.
b）可能原因：试剂过期；解决方法：使用有效期内的产品.
c）可能原因：洗板液配制中出现问题,如量筒不干净含HRP酶抑制物（叠氮钠等）;解决方法：使用干净的器皿,正确配制试剂.
d）可能原因：温育的时间或温度不够；解决方法：校正温育箱温度.
e）可能原因：标准品失活或者丢失；解决方法：标准品正确保存 溶解和混匀.
f）可能原因：抗体失活或者丢失；解决方法：更换抗体或者提高抗体浓度.
g）可能原因：酶失活或者丢失检查方法：把工作浓度的酶再稀释20-100倍,取5uL加入100ul的显色液A和B混合底物,终止后显色是否能达到1.0左右,此为酶的粗略估计.解决方法：更换酶或者提高酶的浓度.h）可能原因：显色底物失活检查方法：加少量的工作浓度的酶,TMB是否很快显色.解决办法：更换显色底物.
3 试验结果空白背景高,这是什么原因造成的? 答：试验结果空白背景高,常见原因如下：
a）可能原因：洗板不干净；解决方法：充分洗涤,彻底拍干；洗板要防止交叉污染；浓缩洗液准确配制；吸嘴尽可能一次性使用；加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染.
b）可能原因：显色液变质或者试剂过期；解决方法：检查试剂盒有效期.c）可能原因：蒸馏水受酶等污染；解决方法：使用新鲜蒸馏水；
c）可能原因：试剂混用；解决方法：不同批号试剂勿混用.
e）可能原因：培养箱温度超过37℃或反应.
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