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当前位置：首页 > 山羊ELISA试剂盒> 科研 山羊传染性胸膜肺炎抗体（CCPP Ab）检测试剂盒
试验原理
试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被目的蛋白捕获抗原的包被微孔中，依次加入待测样本和标准品，再加入HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（酸性溶液）作用下，最终转化为黄色。在酶标仪450nm波长上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中目的蛋白的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中目的蛋白的浓度。
试验所需自备试验器材
1、酶标仪（450nm）
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
试剂准备
1、使用前，所有的组分都要至少复温120min，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后15分钟内使用。
操作程序
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
4、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
5、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
6、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
（提示：为获得理想的实验结果，必须彻底移除残留液体。洗板完成之后，请立即进行下步操作，不要让微孔板干燥。）
7、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
8、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定计算时请最后乘以总稀释倍数(x n)。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
声明
该试剂盒仅供研究使用，如将其用于临床诊断或任何其他用途，我公司将不对因此产生的问题负责，亦不承担任何法律责任。
温馨提示
本公司提供代测服务，凡购买本公司ELISA试剂盒的客户，均可享受免费的ELISA代测服务。
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客户服务--如果我们不能使客户满意，会有其他人这么做！
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1. 客户服务--如果我们不能使客户满意，会有其他人这么做。 向以“服务、客户、技术”为根本。客户是 的核心；客户是我们的服务、产品质量的定义者， 秉持：诚信原则，非常重视客户的意见与感受；在所提供的品质产品及服务中获得合理利润的前提下，使我们尊敬的客户满意是至关重要的！因为如果我们做不到，会有其他人这么做。
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